RNAscope®技術(shù)由美國Advanced Cell Diagnostics（ACD）公司于2012年推出，是RNA原位雜交（ISH）領(lǐng)域的革命性突破。該技術(shù)通過獨特的雙Z探針設(shè)計和級聯(lián)信號放大系統(tǒng)，實現(xiàn)了單細(xì)胞水平上單個RNA分子的可視化與精確定量，解決了傳統(tǒng)PCR和原位雜交技術(shù)無法兼顧“原位信息"與“高靈敏度"的痛點。

一、技術(shù)原理：雙Z探針如何攻克原位雜交的世紀(jì)難題？

1. 探針設(shè)計：特異性與靈敏度的平衡藝術(shù)

每個目標(biāo)RNA對應(yīng)專屬的Z形探針，每對探針由兩條獨立序列構(gòu)成：

- 底部：18-25個堿基，精準(zhǔn)互補結(jié)合目標(biāo)RNA；

- 頂端：雙探針拼接成28個堿基的結(jié)合域，用于捕獲信號放大前體序列。

創(chuàng)新性要求兩探針必須緊鄰結(jié)合才能觸發(fā)信號，將非特異性結(jié)合導(dǎo)致的背景噪音降至近乎為零。

2. 信號放大：分子“多米諾骨牌"效應(yīng)

信號生成通過四級級聯(lián)放大實現(xiàn)：最終每個RNA分子在顯微鏡下呈現(xiàn)為一個清晰可辨的點狀信號，實現(xiàn)單分子定量。

二、性能優(yōu)勢：為何頂·級藥企與期刊紛紛青睞？

超高靈敏度：僅需3對探針結(jié)合即可檢測單個RNA分子，即使目標(biāo)RNA部分降解（如FFPE樣本）仍可穩(wěn)定檢出；

多重檢測能力：單張切片上同步檢測3種RNA（熒光法）或2種RNA（顯色法），并可聯(lián)合蛋白共標(biāo)；

全流程高效：手工操作僅需2.5小時，兼容石蠟切片、冰凍組織及細(xì)胞樣本；

三、應(yīng)用場景：從腫瘤微環(huán)境到基因治療

1. 腫瘤免疫治療研究的“隱形顯微鏡"

解析PD-1/PD-L1等免疫檢查點在腫瘤細(xì)胞與T細(xì)胞間的空間分布；

追蹤細(xì)胞因子mRNA（如IL-2、IFN-γ）在腫瘤微環(huán)境中的分泌來源。

2. 神經(jīng)科學(xué)：繪制腦中的RNA地圖

可視化神經(jīng)元內(nèi)低豐度非編碼RNA（如lncRNA）的亞定位；

追蹤神經(jīng)活性標(biāo)志物（如c-fos）的動態(tài)表達(dá)。

3. 病毒與宿主博弈的見證者

直接觀察HPV、HIV等病毒RNA在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制位點，為抗病毒·藥物提供靶點證據(jù)。

4. 藥物開發(fā)全周期護(hù)航

靶點驗證：確認(rèn)候選藥物作用靶標(biāo)的組織分布；

臨床前安全評價：檢測藥物是否在非靶器官（如心臟、肝臟）誘發(fā)毒性RNA表達(dá)。

四、技術(shù)進(jìn)化：空間多組學(xué)時代的領(lǐng)·跑者

2023年，ACD進(jìn)一步推出多靶標(biāo)原位共檢方案，已成為單細(xì)胞測序數(shù)據(jù)原位驗證的核心工具，推動“空間多組學(xué)"在腫瘤異質(zhì)性研究中的應(yīng)用。

訂購信息：

品牌	貨號	名稱
ACD	322350	RNAscope™ 2.5 HD Assay - RED
ACD	322300	RNAscope™ 2.5 HD Assay - BROWN
ACD	322430	RNAscope™ 2.5 HD Duplex Assay
ACD	323100	RNAscope™ Multiplex Fluorescent V2 Assay

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