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流式細(xì)胞分選儀的原理如下
流式細(xì)胞分選儀是一種精密儀器，主要用于對(duì)懸浮在液體中的細(xì)胞或其他微小顆粒進(jìn)行快速、高精度的分析和分選。它基于流式細(xì)胞術(shù)原理，通過(guò)激光照射單個(gè)細(xì)胞，同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的物理、生化或分子特性，并根據(jù)預(yù)設(shè)參數(shù)自動(dòng)分選出特定的細(xì)胞亞群。
流式細(xì)胞分選儀是一種基于流式細(xì)胞術(shù)原理的精密儀器，能夠?qū)腋≡谝后w中的細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)快速分析和分選。其工作原理涉及流體動(dòng)力學(xué)、光學(xué)檢測(cè)和電學(xué)分選等多個(gè)系統(tǒng)協(xié)同作用。
樣品制備與流體聚焦： 樣本細(xì)胞需制備成單細(xì)胞懸液，并通過(guò)壓力注入儀器的流動(dòng)室；鞘液在高壓下從鞘液管噴出，包裹細(xì)胞形成鞘流，使細(xì)胞排成單列依次通過(guò)測(cè)量區(qū)(激光與液流垂直相交點(diǎn))，這一過(guò)程稱為流體動(dòng)力學(xué)聚焦，確保細(xì)胞逐一通過(guò)激光束。
光學(xué)檢測(cè)與信號(hào)生成： 激光束(常用488nm波長(zhǎng))垂直照射細(xì)胞，細(xì)胞產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào)：前向角散射(FSC)反映細(xì)胞大小，側(cè)向角散射表征細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜度；熒光信號(hào)則通過(guò)多色熒光標(biāo)記檢測(cè)，不同熒光染料發(fā)射的光被濾光片(如帶通、長(zhǎng)通或短通濾光片)分離后，由光電檢測(cè)器轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。
分選機(jī)制與電荷偏轉(zhuǎn)： 在分選模式下，流動(dòng)室噴口處的壓電晶體高頻振動(dòng)使液流斷裂為均勻液滴，每個(gè)液滴可能包含一個(gè)細(xì)胞；系統(tǒng)實(shí)時(shí)分析信號(hào)，對(duì)符合預(yù)設(shè)參數(shù)(如熒光強(qiáng)度)的細(xì)胞所在液滴施加正負(fù)電荷，未充電液滴落入廢液，帶電液滴在高壓靜電場(chǎng)中偏轉(zhuǎn)至指定收集器，從而實(shí)現(xiàn)高速分選。
系統(tǒng)集成與分選性能： 儀器由液流系統(tǒng)、激光光源、光學(xué)系統(tǒng)和分選系統(tǒng)集成，分選性能包括分選活性)、得率和純度，支持1-4路分選模式，適用于免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域的細(xì)胞亞群分離。
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