詳細介紹下ips干細胞培養基的具體成分

來源：大連板橋醫療器械有限公司 2026年03月10日 16:30

iPS干細胞培養基是維持細胞未分化、高增殖、多能性的核心體系，成分可分為基礎營養、血清/替代物、生長因子、抗氧化/代謝補充、抗污染、小分子調節劑六大類，不同配方（傳統飼養層、無血清、化學成分明確）差異顯著。

一、基礎培養基（核心營養骨架）

提供細胞生存必需的碳源、氮源、維生素、無機鹽與緩沖體系，主流為：

DMEM/F12：很常用，含高葡萄糖、平衡鹽、多種維生素，pH穩定（7.2–7.4），滲透壓約340mOsm。

KnockOutDMEM：專為干細胞優化，低滲透壓、低鈣，適配血清替代物（KSR）。

基礎成分：葡萄糖（4.5g/L）、NaCl、KCl、NaHCO?、CaCl?、MgSO?、酚紅（pH指示劑）、水溶性維生素（B族、葉酸、煙酰胺）。

二、血清/血清替代物（生長與黏附支持）

1.傳統含血清配方（飼養層培養）

胎牛血清（FBS）：10%–20%，含生長因子、黏附蛋白、激素；但批次差異大、有動物源污染風險。

替代方案：KnockOutSerumReplacement（KSR），20%，化學成分明確、無動物源，是iPS主流選擇。

2.無血清/化學成分明確配方（如Essential8/E8）

不含血清，用重組蛋白+小分子替代：胰島素（19.4mg/L）、轉鐵蛋白（10.7mg/L）、亞硒酸鈉（14μg/L），提供鐵代謝、抗氧化與能量支持。

三、關鍵生長因子（維持多能性的核心）

bFGF（FGF2）：必需核心因子，終濃度4–100ng/mL（常用20ng/mL），激活FGFR通路，抑制分化、促增殖。

TGFβ1/Nodal：E8等無血清配方添加（2μg/LTGFβ1），協同bFGF維持未分化狀態。

LIF（白血病抑制因子）：小鼠iPS專用（12.5ng/mL），人iPS通常不依賴。

四、代謝與抗氧化補充劑

L-谷氨酰胺（GlutaMAX）：2mM，細胞能量與蛋白合成必需，易降解，建議用穩定型替代物。

非必需氨基酸（NEAA）：1×，補充丙氨酸、天冬氨酸等，減輕細胞合成負擔。

β-巰基乙醇（2-ME）：100μM，抗氧化，保護細胞免受氧化應激，促存活。

抗壞血酸-2-磷酸鎂：64mg/L，E8配方添加，抗氧化、促膠原合成。

五、抗污染與輔助成分

雙抗（Pen/Strep）：青霉素100U/mL+鏈霉素100μg/mL，抑制細菌污染（科研常用，臨床級多不加）。

兩性霉素B：可選，抗真菌。

BSA（牛血清白蛋白）：0.1%–1%，保護生長因子、減少細胞貼壁損傷。

六、小分子調節劑（提升存活與克隆效率）

ROCK抑制劑（Y-27632）：傳代/單細胞接種時用（10μM），抑制凋亡、大幅提高克隆形成率。

其他：如CHIR99021（GSK3抑制劑）、PD0325901（MEK抑制劑），用于特定多能性維持體系。

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