靶向脂肪酸合成酶（FASN）調控巨噬細胞M2極化的機制研究

研究背景

免疫代謝是當前的熱門研究領域。脂肪酸合成酶（FASN）作為連接脂質代謝與免疫應答的關鍵蛋白，在腫瘤微環境和慢性炎癥疾病中具有重要作用。已有研究表明，FASN的異常表達與M2巨噬細胞的極化失衡密切相關，但其作用機制尚未闡明。M2型巨噬細胞參與炎癥消退、組織修復及腫瘤微環境調控。

本研究旨在探究干預FASN后對巨噬細胞M2極化的影響，為相關炎癥性疾病及腫瘤的免疫治療提供新的理論依據和潛在的藥物靶點。

一、實驗設計與步驟

本研究采用穩定性高、極化可控的THP-1細胞體系建立M2極化模型，并結合FASN特異性抑制劑W106進行靶向干預。為精準評估干預效果，研究以免疫熒光共染技術，同步檢測M2型標志物Arg1和FASN的表達水平與定位。通過激光共聚焦分析采集細胞圖像，觀察熒光強度，實現分子表達的可視化驗證。該技術路線聚焦“靶向干預-表現改變-分子關聯”的邏輯，適用于巨噬細胞功能調控、代謝酶干預效應等機制的研究，為解析FASN介導的M2極化通路提供支撐。

1，細胞培養與分組

將THP-1細胞接種于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養基中，置于37℃、5% CO2恒溫培養箱中常規培養。待細胞密度達到80%后，將其分為未干預的M2模型組與FASN干預組（加入W106抑制劑）。

2，極化誘導

依次進行佛波酯、IL-4/IL-13處理后，置于培養箱中繼續孵育48小時。

3，免疫熒光染色

取出培養板，棄去培養基，PBS洗滌3次后，對細胞進行固定、通透及封閉處理。隨后分別加入Arg1、FASN一抗，4℃孵育過夜，次日加入熒光二抗避光孵育1小時，最后以抗熒光淬滅劑封片。

4，圖像采集與分析

通過激光共聚焦顯微鏡觀察并采集細胞圖像，分析比較兩組細胞中Arg1和FASN的熒光強度，評估干預效應。

所使用的義翹產品

· 產品類型：兔單抗和兔多抗

· 產品名稱及貨號：

Recombinant Anti-Arginase 1/ARG1 Antibody, Rabbit Monoclonal（產品貨號：101235-T38）

Anti-FASN Antibody, Rabbit Polyclonal （產品貨號: 100685-T10）

二、實驗結果

圖1. 免疫熒光檢測結果左側為未干預的M2組，右側為FASN抑制劑W106干預組。藍色：DAPI染色的細胞核，綠色：FASN，紅色：Arg1，底部為Merge

在未干預的M2模型組中，可見明顯的綠色及紅色熒光信號，表明細胞高表達FASN并成功極化為M2表型。相比之下，經FASN特異性抑制劑W106處理后的干預組，其細胞內的FASN熒光強度顯著減弱。值得注意的是，伴隨著FASN表達的下調，代表M2極化程度的Arg1紅色熒光信號也呈現大幅降低趨勢。這一結果有力地證實了抑制FASN的表達可顯著削弱THP-1細胞向M2型巨噬細胞的極化能力。

三、實驗結論

本實驗通過免疫熒光染色及熒光強度分析，證實了FASN在THP-1細胞向M2巨噬細胞極化過程中具有調控作用。干預FASN后，M2巨噬細胞標志物Arg1的熒光強度顯著降低，表明FASN表達受抑可抑制M2巨噬細胞極化。該結果為深入探討FASN參與免疫調控的分子機制提供了實驗依據，也為相關疾病的靶向治療研究提供了新的思路，后續可進一步開展分子機制及體內實驗驗證。

本實驗所用特異性抗體均購自義翹神州（Sino Biological），在免疫熒光染色中表現出優異的特異性與靈敏度。

實驗方案來自產品使用征文大賽用戶投稿，僅供學習交流。