賽默飛色譜及質譜
【藥典】生物藥-在線脫鹽結合單桿液質去卷積功能定性合成寡肽工藝中的雜質
檢測樣品：寡肽藥物
檢測項目：定性合成寡肽工藝中的雜質
方案概述：利用雙三元在線除鹽技術，在保留原一維不揮發性流動相的基 礎上，對樣品中的主化合物及雜質進行分離，達到較好的分離 度，結合二維色譜柱切換技術實現在線脫鹽，二維采用質譜兼 容性流動相，將收集環中餾分脫鹽后轉入質譜，通過去卷積軟 件處理采集數據，可以了解寡肽樣品電荷分布范圍及其分子 量。該方法重現性良好，自動化程度高，值得推廣。
寡肽一般指由2-20個氨基酸殘基通過肽鍵連接形成的生物活 性肽，通常也被稱作小肽，低聚肽或者小分子活性肽[1]。相較 于小分子藥物，寡肽藥物具有更好的靶向性，而對于蛋白質和 多肽，寡肽分子量更小，結構更簡單更容易被人體吸收[2,3]。 目前，肽類合成主要是通過固相肽合成技術，合成過程中難免 會形成相關雜質，包括氨基酸丟失，插入或錯配，有關同分異 構體，以及脫氨基、氧化或還原等降解雜質[4]。液相質譜聯用 （LC-MS）技術作為現代常見的有機化合物定性手段，已被廣 泛用于合成路線中主化合物及有關雜質鑒定, Zhirui Lian等人[5]總 結了質譜用于合成肽雜質分析的優勢，闡述了LC-MS可以用于 合成肽的定性及定量分析。質譜使用者都了解，不揮發性鹽不 能直接進入質譜，而某些不揮發性鹽流動相如磷酸鹽體系，有 特定的緩沖區間，對于一些難分離的化合物可以提升分離度。 為了解決上述問題，二維在線除鹽技術日趨流行。劉珊[6]等人 采用柱切換在線除鹽DGLC-MS 聯用鑒定克林霉素磷酸酯中雜 質，體現了二維液相質譜前端除鹽技術的便捷性及可靠性。本 文借助二維液相色譜實現在線除鹽，結合變色龍軟件去卷積功 能，對合成寡肽工藝中出現的雜質進行定性，研究其電荷分布 及分子量。
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