賽默飛色譜及質譜
【藥典】生物藥-高分辨液質用于膠原蛋白的質量評價
檢測樣品:膠原蛋白
檢測項目:分析鑒定
方案概述:無論是天然膠原蛋白的鑒定,還是重組膠原蛋白的分子量、序列覆蓋度、N端和C端鑒定,以及重組膠原蛋白產品中膠原蛋白的鑒定,都離不開液相色譜-高分辨質譜。本文以Orbitrap質譜檢測器為基礎,介紹膠原蛋白液質檢測方法。
膠原作為細胞外基質的主要成分,是脊椎動物體內含量最豐富的蛋白。膠原研究歷程與人們對生命本質的認識過程密不可分,從纖維學說到細胞學說確立,經歷了數百年的歷程。近百年來,膠原的應用從制革和黏合劑等,逐漸拓展至食品、藥品、化妝品、生物材料,近年來拓展至組織工程、再生醫學及干細胞定向轉化等。可分泌膠原的細胞主要包括間充質細胞及其行生細胞,包括成纖維細胞、成骨細胞、成牙本質細胞、成軟骨細胞和成骨細胞,其他合成膠原的細胞還包括上皮、內皮、肌肉和雪旺氏細胞。膠原合成過程研究已經較為深入,不同膠原具有類似的合成過程。膠原蛋白分子長約300nm、直徑約1.5nm,由3條副鏈以平行、右旋的形式纏繞而成,組成膠原蛋白的肽鏈自身為左手螺旋結構。每條肽鏈的序列特征表現為每隔兩個其它氨基酸殘基即有一個甘氨酸,其序列可用Gly-X-Y表示(X常為脯氨酸,Y常為羥脯氨酸或羥賴氨酸)。根據構成其肽鏈的差異,膠原蛋白可分為多種類型,目前人們在脊椎動物中已鑒別出至少28種大小、序列、組織分布、分子組成各異的膠原蛋白。
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