賽默飛色譜及質譜
【藥典】生物藥-對比HILIC和RPLC-MS用于siRNA雙鏈和解鏈過程的探索
檢測樣品：siRNA
檢測項目：色譜條件和質譜條件對siRNA雙鏈檢測的影響
方案概述：本文對比了兩種常見色譜方法（IP-RPLC和HILIC）與MS的聯用，分析雙鏈siRNA。探索色譜條件和質譜條件對siRNA雙鏈檢測的影響。
siRNA（干擾RNA）是小核酸藥物的重要分支，通常由兩條含有20-25個堿基的RNA鏈互補配對組成。siRNA藥物是基于RNA干擾的機理，RNA的干擾現象是實現轉錄后的基因沉默，這個現象是高度保守的，在很多真核生物中被發現。短于20bp的RNA會與TRBP蛋白結合，進而與AGO2結合，形成沉默復合體的前體preRISC，然后這個RNA里面的反義鏈被選擇性的裝載到preRISC里面，正義鏈被降解，從而形成成熟的沉默誘導復合體RISC。成熟的復合體RISC會與靶向的mRNA結合，RISC中的AGO2蛋白具有核酸外切酶的活性，可以切割mRNA，從而導致基因表達沉默。siRNA是帶負電荷的生物活性大分子，不具備靶向能力，穿透能力差，不穩定。siRNA的遞送系統是制約siRNA藥物發展的最關鍵因素。2020年以Inclisiran為代表的的siRNA藥物在遞送系統上取得創新。Inclisiran在SS鏈（正義鏈）上通過磷酸脂鍵連接3分子的GalNAc，借助GalNAc的作用將siRNA遞送到肝臟，從而實現肝代謝相關疾病的治療。
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